Humanisation

Stratégie d’humanisation

Notre stratégie d’humanisation se base sur le transfert des CDR (CDR grafting) et l’ingénierie guidée par la structure afin de greffer les régions de liaison à l’antigène vers des frameworks d’anticorps humains . Cette approche permet de préserver l’affinité de liaison tout en réduisant l’immunogénicité et en améliorant la compatibilité thérapeutique.

Plateforme intégrée de développement thérapeutique, accéléré par la modélisation

En collaboration avec 9Bio Therapeutics, notre plateforme d’humanisation d’anticorps combine le design par la modélisation 3D, l’ingénierie guidée par la structure et l’évaluation de la développabilité afin d’optimiser les candidats thérapeutiques tout en préservant leur affinité et leurs propriétés fonctionnelles.

En intégrant les analyses in silico à la validation expérimentale, nous facilitons la transition des anticorps issus de la découverte vers des molécules adaptés aux exigences cliniques, présentant une stabilité accrue, une immunogénicité réduite et un meilleur potentiel de biofabrication.

Nous proposons plusieurs approches d’ingénierie et d’optimisation des anticorps adaptées aux besoins spécifiques de chaque programme thérapeutique, allant de méthodes de criblage rapides basées sur les séquences à des approches computationnelles avancées s’appuyant sur la modélisation structurale et les simulations de dynamique moléculaire.

Solutions disponibles


	Humanisation	Hyper-humanisation	Hyper-Humanisation haute résolution
Alignement aux lignées germinales & et sélection des frameworks	Top 3	All Germlines	All Germlines
In silico CDR grafting	✓	✓	✓
Génération de variants par rétro-mutation (optimisation de l’affinité, de la développabilité et de l’immunogénicité)	✓	✓	✓
Évaluation des motifs de risque (deamidation, oxidation, etc.)	✓	✓	✓
Modélisation structurale statique de la tolérance mutationnelle aux interfaces des CDR		✓	✓
Modélisation structurale dynamique (validation de l’alignement stérique)			✓
Évaluation de l’efficacité de production (expression transitoire)	✓	✓	✓
Mesure de l’affinité (surnageants)	✓	✓	✓
Purification et évaluation du potentiel de fabricabilité	Optional	Optional	Optional
Mesure de l’affinité (anticorps purifiés)	Optional	Optional	Optional
Rapport complet	✓	✓	✓

Étapes du processus d’humanisation

Étape 1 – CDR Grafting

Nos approches de dynamique moléculaire et de simulation structurale offrent une compréhension détaillée de la stabilité, de la flexibilité et des interactions moléculaires des anticorps, permettant l’identification précoce des risques potentiels de développabilité. De plus, une caractérisation in vitro précoce de l’affinité et des propriétés de développabilité facilite la sélection rapide des candidats les plus prometteurs pour le développement clinique.


Humanisation	Hyper-Humanisation Hyper-Humanisation haute résolution

Alignements multiples pour la sélection des lignées germinales optimales et des appariements VH/VL	Alignement à l’ensemble des lignées germinales humaines et sélection de la lignée optimale selon la conservation de la géométrie et de l’orientation des CDR

Étape 2 – Production à micro-échelle

Dans la deuxième étape du pipeline, une petite production d’anticorps permettra de mesurer expérimentalement les propriétés des anticorps.
Pour générer des données de qualité, nous utilisons les technologies HPLC-SEC, iQue®3 (cytomètre en flux à haut débit) et des tests ELISA.

Les mesures incluent:
Rendements de production
Efficacité d’appariement VH/VL
Agrégation
Fragmentation

Ces propriétés constituent d’excellents indicateurs prédictifs du potentiel de développabilité, de la fabricabilité, de la solubilité et de la stabilité des anticorps.

Étape 3 – Force et spécificité de liaison

Un pipeline visant à garantir la liaison et la spécificité des anticorps sera développé selon les besoins et les objectifs du client. Un rapport détaillé sera fourni.

La force et la spécificité de liaison sont mesurées par ELISA ou par cytométrie en flux.

Étape 4 – Analyse cinétique à haute résolution

Des courbes cinétiques à haute résolution peuvent être générées pour les anticorps sélectionnés, garantissant une caractérisation complète des variants d’anticorps.

Instruments Disponibles

Acuity Arc HPLC (HPLC-SEC)

Évaluation de la purité et stabilité d’échantillons de protéines
Jusqu’à 96 protéines par jour

iQue^®3 (HTP-Flow Cytometer)

Évaluation de la capacité de liaison et de blocage sur billes et sur cellules
Jusqu’à 384 échantillons en 30 minutes (iQue^®3)
3 lasers (VBR) & 15 canaux de détection (iQue^®3)
Analyse rapide qui demande peu de chaque échantillon (iQue^®3)
Différents kits disponibles avec le iQue^®3:
- Caractérisation d’anticorps
- Profils de cytokines
- Fonction des cellules immunitaires

Sony SH800S (FACS)

Évaluation de la capacité de liaison et de blocage sur billes et sur cellules
Tri cellulaire en tubes ou plaques 384 puits (SH800S)
4 lasers (VYBR) & 8 canaux de détection (SH800S)

Carterra LSA (HTP-SPR) & Octet Red 384 (BLI)

(K_D,k_a,k_d)
Jusqu’à 1152 clones (SPR) & 384 (BLI) par expérience
Classification des épitope (intéractions pairées 384×384)
Cartographie d’épitopes
Criblage of d’extraits bruts ou purifiés
Exécution rapide et demande de petites quantités d’échantillons (SPR)
Jusqu’à 1600 protéines par semaine